Technische Universiteit Delft

Hydrogenase
door M&C

Promotie van dhr. D.J. van Haaster: "Hydrogenases from the Hyperthermophilic Archaeon Pyrococcus furiosus"

13 november 2007 | 15:00 uur
plaats: Aula TU Delft

De heer Drs. D.J. van Haaster | doctorandus in de scheikunde, Nederland
promotor | Prof.dr. W.R. Hagen (TNW)

Hydrogenases from the Hyperthermophilic Archaeon Pyrococcus furiosus Hydrogenase is een "electron-transfer" eiwit en katalyseert de eenvoudigste redoxreactie, de reversibele twee-electronoxidatie van moleculaire waterstof in aerobe- en anaerobe micro-organismen. Een kinetische studie van de waterstofoxidatiereactie door het Fe-hydrogenase van Desulfovibrio. vulgaris (Hildenborough) geeft een tweefasig activeringsmechanisme van een geïsoleerd "rustend" enzym, via een intermediaire toestand met relatief lage activiteit, tot een maximaal actief enzym. Waterstof zelf is de activator in de twee opeenvolgende enzymatische activeringsprocessen. Kinetische modelanalyse suggereert, dat de aanname van een steadystate toestand uit de Michaelis-Menten kinetiek niet geldt voor dit hydrogenase. De oplosbare hydrogenase-I van Pyrococcus furiosus bevat een complexe keten van ijzer-zwavel prosthetische groepen voor electronentransport tussen het waterstof-activerende NiFe centrum en de co-enzym-activerende flavine. Analyse met EPR heeft laten zien dat de hydrogenase een nieuw lid is van de groep van multiheteromere ijzer-zwavel flavine enzymen met Fe/S clusters met afwijkende redoxeigenschappen. De steady-state kinetiek van het oplosbare NiFe-hydrogenase-I van P. furiosus is opnieuw bestudeerd. De resultaten suggereren, dat dit enzym functioneel vergelijkbaar is met NADreducerende, oplosbare, multimere NiFe-hydrogenase in Ralstonia eutropha met een K van 37 µM voor H . Het oplosbare hydrogenase van P. furiosus heeft een K van ongeveer 37 µM voor NADP+. Het oplosbare hydrogenase van P. furiosus heeft blijkbaar een functie heeft in de regeneratie van NADPH, waarbij waterstof, geproduceerd door het membraangebonden hydrogenase tijdens protonrespiratie, wordt hergebruikt.

Meer informatie?
Voor inzage in proefschriften van de promovendi kunt kijken in de TU Delft Repository op: repository.tudelft.nl. TU Delft Repository is de digitale vindplaats van openbare publicaties van de TU Delft. Proefschriften zullen binnen een paar weken na de desbetreffende promotie in de Repository te vinden zijn.

Laatst gewijzigd: 25 oktober 2007