Rijksuniversiteit Groningen

Werking van het enzym quercetinase zichtbaar gemaakt

Quercetinase (2,3QD) is een enzym dat de inbouw van zuurstof katalyseert in zogenaamde flavonolen. Dit zijn natuurlijke verbindingen die bijvoorbeeld verantwoordelijk zijn voor de kleur van rode wijn. De Groningse onderzoeksgroep biofysische chemie helderde de driedimensionale structuur van quercetinase op tot een resolutie van 1,6 AA'. Roberto Steiner deed vevolgens gedetailleerd onderzoek naar het precieze werkingsmechanisme van dit enzym waar een koper ion een belangrijke rol vervult. In zijn proefschrift beschrijft Steiner zijn multidisciplinaire onderzoek naar het katalytisch mechanisme van het quercetinase uit de schimmel Aspergillus japonicus. (Hij maakte daarbij gebruik van Röntgendiffractie, electronen paramagnetische resonantie (EPR), Röntgen absorptie spectroscopie en Density Functional Theory (DFT) berekeningen.) Steiner maakte onder andere zichtbaar hoe binding van remmers van het enzym de heterogene omringing van het koper ion beïnvloedt. Dit deed hij door de kristalstructuren van 2,3 QD te bepalen in aanwezigheid van de inhibitors diethyldithiocarbamaat en kojinezuur. Toen hij met behulp van kristallografie enzym-substraatcomplexen onderzocht in afwezigheid van zuurstof, toonde hij aan dat de - gewoonlijk vlakke - substraten tot grote verrassing gebogen bleken te zijn: `de B-ring was uit het vlak van de A- en C-ringen geduwd' met consequenties voor de structuur die verhelderend zijn voor de enzymwerking. In zijn laatste hoofdstuk geeft Steiner bovendien een voorlopige DFT analyse van het reactiemechanisme van quercetinase. /FC

Roberto Steiner (Venetië, Italië, 1969) studeerde scheikunde aan de universiteit van Padova. Zijn promotieonderzoek verrichtte hij bij biofysische chemie van de Rijksuniversiteit Groningen.

Datum en tijd

dinsdag 9 april, 13.15 uur

Promovendus

R.A. Steiner, tel. (050)363 43 83, fax (050)363 48 00, e-mail: r.a.steiner@chem.rug.nl (werk)

Proefschrift

Mechanistic studies of the copper-dependent quercetin 2,3-dioxygenase from A.japonicus. X-ray christallography, spectroscopy and theoretical calculations

Promotor

prof.dr. B.W. Dijkstra

Faculteit

wiskunde en natuurwetenschappen

Plaats

Aula Academiegebouw, Broerstraat 5, Groningen